Sperm elde etme yöntemleri için bugün kullanılan yöntemler perkütan ya da açık cerrahidir. NOA vakarlında spermatozoa sadece testisten elde edilebilir. Obstrüktif azoospermi vakalarında sperm testisten başlayarak üreme kanalının bir bölgesinden elde edilebilir. Vaz deferens yada seminal vezikal aspirasyonu ile de sperm elde edilebilirse de, en çok kullanılan kaynak testis yada epididimdir.
Epididim den perkütan yolla (PESA) aspirasyonu ya da açık ameliyat ile ameliyat mikroskop kullanarak (epididim kanalını görüp disseksiyon ve kesi yapabilmek için x25 büyütmenin üzerinde olması gerekir) (MESA) sperm elde edilebilmesidir. PESA (Perkütan Epididimal Sperm Aspirasyonu) ile basit, ameliyathane şartları gerektirmeyen, lokal anestezi ile sperm aspire edilebilmektedir. Fakat işlem sonrası epididimde yol açılan zarar (epididim kanallarına verilen travma sonrası gelişecek obstrüksiyon) ve elde edilen sperm sayısının azlığı göz önüne alındığında obstrüktif azoospermide ilk tercih edilecek yöntem PESA olmamalıdır.
MESA (Mikroskobik Epididimal Sperm Aspirasyonu) da ise ameliyathane şartlarında mikroskop ile epididim kanalı disseksiyon ile açılır. Epididimal sıvı aspire edilir ve bu sıvıdan sperm elde edilir. PESA ile karşılaştırıldığında daha bol sperm elde edilebilmektedir ve epididim kanalına daha az zarar vermektedir, fakat mikro cerrahi işlem olduğundan ameliyathane şartları ve daha uzun süre gerekmektedir. Obstrüktif azoospermilerde testiste normal spermatogenez genellikle beklenen bir durum olduğundan lokal anestezi altında ameliyat şartlarına gerek duyulmadan testisten alınan doku örneğinden kolaylıkla spermatozoa (klasik TESE) elde edilebilmektedir. Bu nedenle obstrüktif azoospermide MESA da ilk tercih edilen yöntem olmadığı gözükmektedir.
Testisten spermatozoa elde edilme yöntemi, son yıllarda ICSI yönteminin daha yaygınlaşması ile, testisten elde edilen spermlerin taze yada dondurulup-eritilerek kullanılmasın ve başarılı gebelik elde edilmesinden sonra daha da yaygınlaşmıştır.
Testisten sperm elde edilmesi de iki yolla olabilmektedir:
Perkütan aspirasyon (TESA=TEstiküler Sperm Aspirasyonu) ya da açık cerrahi yolla (TESE= Testiküler Sperm Ekstraksiyonu) elde edilmektedir. TESE de uygulanış şekline göre “klasik” olarak adlandırılabilecek eskiden uygulanan testis biyopsisi şeklinde, ya da mikro cerrahi yöntemler ile “mikro-TESE” olarak ikiye ayrılır.
Obstrüktif azoospermide testis içinde yaygın ve normal spermatogenez beklendiğinden, TESA ya da klasik TESE için uygun yöntemlerdir. Azoospermi vakalarının çoğunluğu non-obstrüktif vakalar oluşturmaktadır. TESA ve klasik TESE ile NOA vakarlında spermatozoa elde etme oranı mikro-TESE vakalarına göre çok daha düşüktür. Bu nedenle NOA sperm elde edilmesinde altın standart mikro-TESE dir. Tunika albiginua açılmasından sonra testis içinde genişlemiş tubulus semineforuslarda aktif spermatogenez olasılığı daha yüksektir.
Ameliyat mikroskobu ile (x20 büyütmenin üzerinde) genişlemiş ve daha opak görünen lokalize spermatogenez odakları saptanıp bu dokunun toplanması ile NOA vakarlında %50 oranın da spermatozoa elde edilebilmektedir. Spermatozoa yardımlı üreme tekniklerinde ya hemen kullanılır yada dondurulup sonra eritilmek üzere saklana bilmektedir. Histolojik değerlendirmeye göre NOA hastalarının sperm elde etme oranları şöyledir:
En yüksek oran ~% 70 oranıyla hipo spermogenez, ~%50 oranında spermatogenetik duraklama ve en az ~% 25 oranı ile germ hücresi aplazisi vakalarındadır.